杭州细胞培养室设计方案 ,营养条件
1.培养基
细胞培养基包含细胞生长所需的各种营养物质,包括碳水化合物、氨基酸、无机盐、维生素等。针对不同细胞的营养需求,有多种合成培养基可供选择,如EBSS、Eagle、MEM、RPMll640、DMEM等。
2.其他添加成分
在各种合成培养基提供基础营养物质之外,还需根据不同细胞和不同的培养目的添加其他成分,如血清、因子等。
血清提供的是细胞外基质、生长因子和转铁蛋白等重要物质,常用的是胎牛血清。要根据不同的细胞和不同的研究目的决定添加血清的比例。10%~20%的血清能维持细胞较快的生长增殖速度,称为生长培养液;为维持细胞缓慢生长或不死,添加2%~5%的血清即可,称为维持培养液。但血清中也存在有害于细胞生长和繁殖的物质,如补体、免疫球蛋白和一些生长抑制因子;成分不明确,影响对结果的分析;不同动物、不同批次的血清活性差别较大,影响培养效果的稳定性。
谷氨酰胺是细胞生长重要的氮源,在细胞生长代谢过程中起重要作用,但由于谷氨酰胺在溶液中很不稳定容易降解,4℃下放置7天即可分解约50%,故谷氨酰胺需在使用前添加。
设施器材
设施:超净台、恒温培养箱、倒置显微镜、液氮储存罐、电热鼓风干燥箱、冰柜、电子天平、恒温水浴槽、离心机、压力蒸汽消毒器。
器材:
一、玻璃器材
无菌室,培养皿、滴流瓶、刻度吸管、离心管、培养瓶、烧杯、量筒、三角烧瓶
二、塑料器材
多孔培养板、培养皿、培养瓶
三、橡皮器材
橡皮制品(**是硅制品)做各种瓶或试管的塞子、盖子。
四、金属器材
剪刀、镊子、手术刀、解剖刀、血管钳、组织镊、眼科镊及各种型号针头
五、其他物品
纱布、注射器和针头